Процесс синтеза олигонуклеотида
Специфический процесс синтеза твердой фазы олигонуклеотидов состоит из четырех циклов: детритилирование, сочетание, окисление и ограничение, а один цикл генерирует новый нуклеотид.
1. detithylation
Первая реакция, детритилирование, удаляет 5'-диметокситритильную группу защиты от опорного нуклеозида.
2. Соединение
Вторая реакция включает в себя соединение соответствующего мономера фосфорамидита (A, C, G или T), смешанного с активатором.
3. Окисление/тиолирование
Недавно сформированная межклеотидная связь фосфита затем преобразуется в соответствующий фосфоротиоат или фосфодиэстер с тиолизирующим или окисленным реагентом соответственно.
4.capping
Последним шагом в цикле синтеза является ограничение непотихованных 5'-гидроксильных групп.
Приложения
• Олигонуклеотидные препараты
• Праймеры секвенирования ДНК и гибридизационные зонды
• Синтез антисмысловых нуклеиновых кислот
• Синтез РНК
Технические особенности
STS можно использовать для синтеза шкалы от 50 мкмоль до 9 ммоль.
Олигонуклеотидные синтезаторы Truesynt предлагают:
• Гибкость в методах синтеза, химии и масштабах
-фосфодиэфир и/или фосфоротиоат ДНК, РНК -олигонуклеотиды
• Хороший синтез экономики
- низкое потребление амидита
- генерирует значительно меньше отходов
- Повторная циркуляция мономерных решений
• высокая пропускная способность
- Время цикла для синтеза 1 мкмоль составляет менее 5 мин.
• Простой метод разведка и масштабирование
- Синтез до семи олигонуклеотидов последовательно
-Проплят метод масштабируется без оптимизации дополнительной метода
- STS хроматография рабочей станции, прозрачная для масштабирования
• Онлайн-мониторинг для анализа процессов (PAT)
- проводимость, УФ-вис и давление
