При очистке белка и антител, как точно найти целевой образец, является важным параметром для рассмотрения во время эксперимента. Как выбрать соответствующую длину волны поглощения связана с успехом нашего эксперимента по разделению и является основой для нашего экспериментального проекта протокола.
Как мы все знаем, ультрафиолетовое поглощение скота, принадлежащего белкам, получено из ароматических аминокислот, таких как хромотические кислоты и тирозин, которые содержат конъюгированные двойные связи в молекуле и имеют самый большой пик поглощения света вокруг длины волны 280 нм. Поскольку большинство белков содержат остатки тирозина и триптофана, измерение поглощения белков при 280 нм является одним из самых быстрых способов анализа содержания белка в растворе.
Тем не менее, некоторые белки имеют несколько или непересеченные ароматические аминокислотные остатки и, следовательно, имеют слабую поглощение при 280 нм. В дополнение к белкам, другие биомолекулы также имеют спектральное поглощение.
Ниже мы перечислим некоторые общие биологические длина волн волн разделения пробы в качестве ссылки на разделение:
Detection Wavelength（nm） | Sample Type |
214 | Peptide samples, as well as partial protein samples containing peptide bonds |
230 | Organic mixtures as well as chaotropic salts |
260 | DNA/RNA |
280 | Aromatic amino acid residues (tryptophan, tyrosine, and phenylalanine) |
390/420 | coenzyme |
490 | GFP（Green fluorescent protein） |
600 | Protein aggregates |
Системы очистки белка Yocell с различными размерами УФ -детектора. Фиксированная длина волны может обнаружить разделение целевых компонентов в режиме реального времени, а переменная многоволновая длина может одновременно наблюдать за целевыми белками и ключевыми примесями, чтобы соответствовать выбору определения длины волны во время эксперимента.
Detector model | Detector name | Wavelength range | Note |
F1 | Fixed single wavelength detector | default wavelength: 280nm | If necessary, the wavelength value can be changed |
F2 | Fixed dual wavelengths detector | default wavelength: 260/280nm |
V2 | Dual channel variable wavelength detector | 200-400nm | Detect 2 wavelengths at the same time |
V4 | Qual channel variable wavelength detector | 200-400nm | Detect 4 wavelengths at the same time |
V6 | Qual channel variable wavelength detector | 200-600nm |
V8 | Qual channel variable wavelength detector | 190-840nm |
